七、凋亡基因mRNA水平的检测

凋亡调控基因可分为两大类：①诱导基因：如野生型p53、bax、AP0‐1／Fas基因等。抑制基因:如bcl‐。2、bcl‐x、突变型p53、ras、survivin基因等。诱导基因蛋白产物的表达上调，可提高细胞对凋亡诱导信号的敏感性，促进细胞凋亡。检测细胞内这些特异基因的表达水平亦成为检测细胞凋亡常用方法。RT‐PCR法检测凋亡调控基因mRNA水平。细胞培养并经药物处理,收集细胞，4℃离心1200rp m × 7min，用0.1%DEPC处理过的PBS洗1次。目前还可用荧光定量PCR技术来检测基因表达水平，比半定量RT‐PCR更快、更准确。