[文献资料]三、RT‐PCR法扩增目的基因

首先从生物体的器官、组织、细胞中提取总RNA，以其中的m RNA作为模板，以目的基因下游序列为模板设计m RNA反转录引物，或以真核生物m RNA3 ′末端的ploy A为模板，化学合成oligo（d T）为反转录引物，长度一般在17～25bp不等。利用反转录酶、反转录引物、4种d NTP反转录生成c DNA，再以c DNA为模板，利用目的基因的上游、下游（下游也可以用oligo（d T）为引物）设计的引物，通过PCR扩增富集目的基因。产物经凝胶电泳等方法分离并回收目的基因。