[速览]步骤11 多肽消化物的化学衍生化

本方法为将消化液中的多肽的赖氨酸残基胍基化，随后对N端α‐氨基进行磺化。赖氨酸侧链胍基化。本法采用一种新的、经修饰的水稳定试剂使消化液中多肽N端α‐氨基磺化，如果不进行多肽赖氨酸残基胍基化，步骤B和C可以省略。多肽消化物重溶于胍基化试剂[2m lO‐methylisourehydrogen sulphate溶液(86mg/mlM illiQ水)与8m l 0 ﹒ 25mol/L NaHCO 3 pH11.5混合]。也可采用反相HPLC，已衍生化的多肽与反相C18柱（15cm × 300 μ m）结合，5%～95%乙腈梯度洗脱，多肽洗脱为三个连续组分（每组分4～5 μ l），随后一个组分用于MALDI多肽质谱指纹分析，一个组分进行MS／MS分析。或者,进行微量脱盐浓缩。