动物在麻醉状态下彻底抽尽血液后,迅速取出目的骨组织(如胫骨、腰椎等),分离、剔除附着的肌肉及结缔组织,用慢速锯打开骨髓腔并切割成所需的体积,立即放入10%多聚甲醛缓冲液固定,但不超过12h,以免对荧光标记造成影响。一般切下不脱钙4 μ m的切片进行化学染色,如Masson-Goldner Trichrome染色或甲苯胺蓝染色,用于骨组织计量学静态参数和细胞学测量,切下不脱钙8 μ m的切片不染色封片做荧光观察,进行骨组织形态计量学动态参数测量。磨片是将在包埋块中的胫骨中段先用慢速锯锯成100 μ m厚的骨片,切锯骨包埋块时从胫腓韧带联合近侧端以胫骨干下端与腓骨完全分离为有效骨片(图8-3-。
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