2﹒阳离子清蛋白修饰载siRNA纳米粒的构建及体外评价

载siRNA质粒纳米粒(CBSA‐NP‐siRNA)的制备与表征:siRNA‐pDNA为水溶性核酸物质,采用复乳／溶媒蒸发法制备CBSA‐NP‐siRNA，制备流程如下：200 μ l插入B3序列的siRNA‐pDNA溶液作为内水相（200 μ g pDNA ＋ 5mg无核酸酶的BSA溶解于200 μ l TE缓冲液中）。加入1ml含10mgMPEG‐PLGA和1mgMAL‐PEG‐PLGA的二氯甲烷溶液中，以120W、30秒连续超声制备初乳，以120W、5秒／次× 15次间断超声制备复乳。经考察，纳米粒的制备工艺、体外酸性环境和酶环境对DNA结构功能完整性的影响较小，适合基因药物载体的制备。上述细胞内示踪结果显示，CBSA‐NP能够通过内体‐溶酶体逃脱机制迅速进入胞质，介导质粒DNA进入核内。