真核细胞m RNA的传统分析方法有Northern Blot、RNAdot/slot、RNase保护分析以及原位杂交等,其中Northern Blot法应用最广泛,能检测μ g级纯化的Poly(A)RNA。Northern Blot杂交是RNA混合物首先按照它们的大小通过变性琼脂糖凝胶电泳加以分离。分离出来的RNA被转至硝酸纤维素膜或尼龙膜上。用一个放射性核素或酶标记的DNA探针与固定的RNA进行杂交。探针通过配对序列仅与特异的RNA结合。杂交RNA的大小和密度可通过放射自显影术或酶促反应颜色检测来显示。RNA转移、杂交、放射自显影步骤同甲醛变性电泳中操作方法的.
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