本品为叶酸抗代谢剂,对多种动物肿瘤有抑制作用。在大剂量时对非增殖细胞特别是肝细胞也有直接毒性作用。近年来利用癌细胞与正常细胞间的细胞动力学差异,甲酰四氢叶酸钙可救援增殖快的正常细胞不受甲氨蝶呤的细胞毒作用。在甲酰四氢叶酸钙的解救下,大大增加甲氨蝶呤的剂量,提高治疗指数,加强抗癌效果,而毒性仍可耐受。经吸收后60%~85%与血浆蛋白结合,若同时服用乙酰水杨酸或磺胺类均可排挤结合的本品,因之疗效和毒性都有增高。