与细胞内游离Ca2 +浓度测定的原理基本相似,荧光指示剂为2,7‐二氯荧光素(2,7‐dichlorofluores‐cin,DCF)。DCF本身是一种非荧光性化合物,可被NO氧化形成具有荧光特性的化合物2,7‐dichlo‐rofluorescin,其荧光强度与NO浓度呈正相关。用DCF给细胞负载后,用荧光光度仪、显微荧光分光光度仪及流式细胞仪检测DCF氧化程序,以NO真溶液的标准曲线进行校正,则可连续动态实时监测细胞内NO定量变化。首先采用DCF‐AM对细胞内NO形成量进行了流式细胞分析。大量研究表明NO和ROS等与细胞损伤关系密切,因此用DCF同时监测细胞内NO和ROS,对细胞的病理生理学研究具有重要意义。
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