[文献资料]三、神经干细胞的免疫组织化学鉴定法

1%多聚甲醛。大鼠巢蛋白（NES‐TIN）抗体。FITC‐标记的抗小鼠IgG和细胞免疫组化相关试剂等。L‐多聚赖氨酸（PLL）50 μ g／ml无菌水溶液。6孔细胞培养板，盖玻片（24mm × 24 mm），荧光显微镜等。加入NESTIN抗体(1∶100稀释), 37℃作用2h。荧光显微镜下,观察到发红色荧光的细胞是NESTIN抗体阳性细胞，即神经干细胞。抗体质量和浓度是关键。根据抗体产品所推荐的应用浓度调节相应的抗体稀释倍数。Be‐ta‐Tubulin‐Ⅲ抗体。培养8天后取出玻片，按照下面步骤进行四种抗体中Beta‐Tubulin‐Ⅲ，GFAP，Gal‐c和NESTIN的免疫细胞化学染色。神经干细胞的分散成单个细胞更有利于分化后细胞类型的鉴别。