（二）蛋白质印迹（Western blot）

转膜液, pH8.3：Tris base3.03g，甘氨酸14.4g，甲醇200ml，加dd H2O至1L。转膜:根据预染蛋白质分子量标准裁剪所需凝胶及相应大小的NC膜，在转移缓冲液（transfer buffer）中平衡10min。打开蛋白质转移槽夹板，依次放入已浸湿平衡的海绵、滤纸、凝胶、NC膜、滤纸、海绵，小心赶走各层之间的气泡，合上夹板，立即放入转移槽中，4℃转移，电压300mA，转移2h。一抗反应:将NC膜封入杂交袋，加入特异性鼠单克隆抗体（稀释度1 ∶。用凝胶成像分析系统观察、照相，以Gel Doc2000system和Quantity one soft ware（BI O‐RAD）进行条带扫描，读取吸光度值，半定量分析。