[辅助检查]四、注意事项

Western印迹中转移在膜上的蛋白质处于变性状态，空间结构改变，因此那些识别空间表位的抗体不能用于Western印迹检测。这种情况可以将表达目的蛋白质的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白质先生物素化，再用酶标记亲和素进行Western印迹。为了便于观察电泳效果和转膜效果，以及判断蛋白质分子量大小，最好使用预染蛋白质分子量标准。电泳时通常推荐在上层胶时使用低电压恒压电泳，而在溴酚蓝进入下层胶时使用高电压恒压电泳。通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳，或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的 ......