[辅助检查]三、操作步骤

转染后24～48h可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min，细胞裂解液于4℃，12 000rpm离心30min后取上清液。取少量裂解液以备Western印迹分析，剩余裂解液加1 μ g相应的抗体加入到细胞裂解液，4℃缓慢摇晃，温育过夜。取10 μ L protein A琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗3次，每次3000rpm离心3min。将预处理过的10 μ L protein A琼脂糖珠加入到和抗体温育过夜的细胞裂解液中，4℃缓慢摇晃，温育2～4h，使抗体与protein A ......