[速览]（二）平端的连接

T4DNA连接酶也能催化限制性内切酶切割产生DNA平末端的连接。1 ﹒外源DNA带有互补突出端的连接如果目的序列和载体上没有相同的限制性内切酶位点可供利用，用不同的限制性内切酶切割后的粘性末端不能互补结合，则可用适当的酶将DNA突出的末端削平或补齐成平末端，再用T4DNA连接酶连接，但平末端连接要比粘性末端连接的效率低得多。因而，常常使用碱性磷酸酶去除5 ′磷酸基团以抑制质粒DNA的自身连接和环化。因为环化DNA（即使只带切口的环状DNA）的转化效率比线状DNA高得多，所以大多数转化体都含有重组质粒。 ......