[辅助检查]二、用大肠杆菌DNA聚合酶ⅠKlenow片段标记合成的寡核苷酸

在某些情况（例如用寡核苷酸作Southern印迹杂交的探针）下，重要的是要将寡核苷酸标记至尽可能高的放射性比活度。但用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段合成与寡核苷酸互补的DNA链，则可得到比活度更高的探针。用一短引物与待标记的放射性探针序列互补的寡核苷酸探针杂交。该引物在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ Klenow片段的作用下延伸，从而使［ α‐32P ］ dNTP在模板指导下发生掺入。反应后，通过对模板和产物进行变性继而通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳将它们分开。用这种方法制备合成寡核苷酸探针，可以使每一寡核 ......