二、SAGE技术方案简介

SAGE技术方案主要包括三个阶段：SAGE文库的构建.将带有接头A、B的两种SAGE标签，分别用DNA聚合酶（Klenow酶）进行末端补平、混合，并用连接酶（ligase）连接，得到带接头的双标签（lingker-adapted ditag）。用T4 DNA连接酶连接SAGE双标签，获得双标签形成的多聚体（concatemer）。这样，得到的克隆其插入序列是由一系列20～22bp长的SAGE双标签组成，每两个双标签中间由4bp的Nla Ⅲ酶切位点CATG分隔开。3 ．去除重复出现的双标签序列，包括在反向互 ......