在课题设计中,我需要使用相对定量逆转录聚合酶链反应( reverse transcription-polymerase chain reaction , RT-PCR )检测样品中V2R mRNA相对表达水平,这就牵涉V2R引物设计及其验证工作,我把我的经历写出来,希望能给刚刚接触该实验的新手提供参考。在引物设计过程中,我采用的是Invitrogen在线引物设计软件,当时不敢确定效果如何,只等BLAST结果来验证。图1 - 4 - 1 - 19结果显示, RT-PCR电泳图(左) 、熔点曲线图(中)和荧光 ......