因为三羧酸循环是在线粒体内进行的,所以分析三羧酸循环相关的酶活性代表了线粒体的功能。草酰乙酸和乙酰CoA醛缩合为柠檬酸辅酶A,在柠檬酸合酶作用下水解生成柠檬酸,柠檬酸辅酶A是一种高能硫酯中间产物,驱使整个反应向柠檬酸合成的方向进行。继而和辅酶A结合,在酶的活性中心形成柠檬酰辅酶A。位于酶274位组氨酸通过提供一个质子的方式水解硫酯键,辅酶A与柠檬酸分离,柠檬酸与酶分离,酶恢复最初的开放构象。0.2M乙二胺四乙酸钙钠(EDTA)溶液中反应生成硫氢辅酶A(coenzyme A-sulfhydryl),其在41 ......