三、自动激光荧光DNA测序注意事项

自动激光荧光DNA测序时，需注意的主要问题如下：无测序信号。导致测序峰重叠的原因有多种，常见的有：①在克隆测序时，所挑重组子不是单克隆，所提供的测序质粒模板中含有2种以上插入片段的不同质粒。在PCR测序模板中,因碱基缺失或PCR产物不纯（即含有2种以上长度不等但部分序列一致的片段），均可导致多处重叠峰出现。测序引物有碱基缺失(通常是靠引物的5′端缺失),则可导致从测序一开始就出现移码，从而产生严重的重叠峰。解决方案有：①仔细核对干扰峰位点和测序结果的文本序列，并与基因库中的序列相比较。若干扰峰位点恰好是某 ......