尽管因核酸探针种类和标记物的不同,原位杂交技术在具体应用的方法上各有差异,但其基本方法和原则大致相同,可分为标本制备、杂交前处理、杂交反应、杂交后处理和杂交体检测五大基本步骤。在实际操作中,杂交温度的选择是:当杂交液中的甲酰胺浓度为50% ,盐浓度为0.75mol/L时, DNA探针的杂交温度为42 ℃左右, RNA探针杂交温度为50 ~ 55 ℃ ,寡核苷酸探针的杂交温度为37 ℃左右。地高辛标记蛋白激酶C ( PKC ) β 1寡核苷酸探针, AP标记抗地高辛抗体免疫组织化学( ABC-DABNi法) ......