第二节　荧光染料的选择与常用的染色技术

一个分子要发荧光，首先要吸收光能，使电子跃迁到较高能级或激发态，当电子释放出部分或全部光能时，就会发出荧光。几乎所有的情况下，失去的激发能是非辐射性的，失去的能量低于吸收的能量，也就是说，发射光的波长比激发光的要长。FITC ：发射波长在520nm的荧光染料，是目前最常用的荧光标志物，它的激发波长接近于488nm ，光量子得率高，但受pH影响较大。影响复合荧光素的因素包括每种染料分子的结合特性和共价键或化学键的结合效率，后者决定了供体荧光染料将能量转移到受体（通常是Texas Red或CY5 ）的效果。确 ......