第三节　引物二聚体终于消失了

通过荧光定量PCR进行细胞基因表达差异分析是科学研究的常用方法。2010年底，我接受了一项肝细胞表达差异的课题。基于资金有限，我们选择了SYBR Green染料法而不是探针法，对基因的表达进行相对定量。通过Oligo 7软件，我精心设计了Ta值相同的目的基因（ target ）和管家基因（ actin ）的上下游引物。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。我将引物浓度从终浓度0.4 μ mol/L减少到0.1 μ mol/L均没有有效减少二聚体的形 ......