为了通过免疫组织化学实验检测某蛋白A在小鼠体内表达情况,我需要购买蛋白A抗体。但是问遍所有生物试剂公司,均没有此蛋白A抗体销售。唯一选择是通过分子克隆和原核表达方法得到蛋白A ,继而再自行制备其抗体。我选择pGEX-6p-1为原核表达载体,拟通过GST-A融合方式表达并纯化蛋白A 。我顺利构建pGEX-6p-A原核表达载体,并通过诱导表达,经SDS-PAGE电泳鉴定,如图2 - 4 - 1 - 1泳道2箭头处所示,成功诱导出GST-A 。为保证要制备的单克隆抗体特异性和效价,要求蛋白A在纯度上至少达到95 ......