[辅助检查]第二节 真 核 表 达

在各种表达系统中，最早被采用进行研究的是原核表达系统，这也是目前掌握最为成熟的表达系统。该项技术的主要方法是将已克隆入目的基因DNA片段的载体（一般为质粒）转化细菌（通常选用的是大肠杆菌），通过IPTG诱导表达并最终纯化获得所需的目的蛋白。但与此同时原核表达系统还存在许多难以克服的缺点，如许多蛋白质在翻译后，需经过翻译后的修饰加工，如磷酸化、糖基化、酰胺化及蛋白酶水解等过程才能转化成活性形式，而大肠杆菌缺少上述加工机制，不适合用于表达结构复杂的蛋白质。5）培养基的离子成分：用缓冲盐溶液（如HEPES缓冲盐 ......