自20世纪80年代,国外科学家成功建立转基因动物技术体系以来,结合基因同源重组和胚胎干细胞培养技术建立发展了基因打靶技术(gene targeting),包括基因剔除(knock‐out,KO)和基因敲入(knock‐in,KI)技术,该技术在广泛应用的基础上。目前,基因的定位剔除、精细突变的引入、染色体组大片段的重排和删除、组织特异性或时空特异性基因剔除已成为可能。将线性化的基因敲入载体经电转移至小鼠ES细胞内,通过同源重组将目的定点突变基因置换ES细胞内源性目的基因片段,获得Targeted ES细胞 ......