先经逆转录酶的作用把RNA逆转录成cDNA,然后在同一反应管中使用DNA聚合酶进行扩增。该方法把逆转录和PCR结合在一起,可快速、灵敏地分析基因的表达。RT-PCR的模板可以是总RNA或poly(A)+选择性RNA。RT-PCR需要逆转录酶、随机引物、Oligo(dT)或基因特异性的引物,包括一步法和两步法两种方法。一般建议少用一步法,二步法运用更灵活机动。以下以二步法为例,简要概述RT-PCR的实验步骤。基因特异性引物可以同与mRNA 3 ′-最末端退火的扩增引物序列相同,或基因特异性引物可以设计为与反 ......