方案三 全细胞蛋白多维色谱-串联质谱蛋白质组分析

菌体培养生长至对数中期, 10 000g离心10min收集菌体（可根据菌的实际情况进行调整），使用冰浴PBS反复润洗3次，菌体重悬在裂解缓冲液［ 2%SDS，50mmol/L Tris-HCl（pH8.0），2mmol/L PMSF，2mmol/L sodium fluoride，2mmol/L sodium orthovanadate ］中。反应结束后，酶解溶液用10kDa的超滤管（Millipore）超滤以除去胰蛋白酶和未酶解完的蛋白质，然后冻干，保存于－ 80℃。搜索注释得到的蛋白质数据库时,对MS ......