[辅助检查]第一节 载体的制备

载体是携带目的DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具。选择合适的载体是基因克隆的关键步骤之一，载体选择的好坏直接影响着基因克隆的效率，作为基因克隆载体的DNA分子，必须具备以下几个条件：载体上应具备多个单一酶切位点,即多克隆位点，以便外源DNA能够插入其中，这些酶切位点所在的区域是其复制的非必需区域。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离，当以pH4.8的高盐缓冲液调节pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠绕的网状 ......