[辅助检查]第七节 DNA 限制性酶切技术

限制性内切酶技术主要用于：基因重组前分别将目的基因片段和载体进行酶切,以便进行两者间连接。1单位限制性内切酶通常定义为，在建议使用的缓冲液及温度下，在20 μ l反应液中反应1h，使1 μ g（λ噬菌体）DNA（约50kb）完全消化所需的酶量。为防止酶切反应不完全，可在消化过程中取少量反应液（如5 μ l）电泳观察，如发现目的基因片段条带密度与载体条带密度之比接近它们之间的bp数之比，可终止酶切消化反应。电泳回收DNA方法：如消化反应体积过大，加样孔盛不下，可在终止消化反应后加以浓缩。例如，DNA的质和量 ......