Taqman探针法同时综合了5 端核酸酶活性和荧光等技术,其在反应过程使用4条寡核苷酸链,其中两条为等位基因特异性探针,两条为PCR引物。两条探针可分别与突变型和野生型模板互补,其两端分别应用含报告基团和淬灭基团的染料进行标记,两条探针的报告基团荧光染料不一样。在进行SNP检测时, PCR扩增的退火过程导致探针与模板杂交结合,当引物延伸至探针处时, DNA聚合酶的5 端外切酶活性将探针的5 端报告基团从探针上切除,使之与淬灭基团分离,从而释放出相对应的荧光,而没有配对的探针仍然保持完整而不会发荧光。不同的 ......