用含10%的胎牛血清的TBS来稀释一抗,并孵育30分钟,适用于最后的固定步骤后的细胞学准备,同时也适用于TBS洗涤后的石蜡切片固定,对初次孵育的洗涤而言,不同的抗体和阴性对照应该使用分开的容器。由于染色的显像性,以下的溶液需每次新鲜配制,每一个染色管的剂量以及附加的顺序对于结果很重要:溶液A:35mlAPAAP缓冲液,12.5ml AP缓冲液,20mg左旋咪唑。1分钟反应时间后,125 μ l的溶液C加上47.5m l的溶液A,然后加300 μ l的溶液B,调整pH值8.8,在加到切片上和振荡器上孵育30 ......