二、方 法

STM主要由两步构成：第一，通过转座子突变构建突变库，即通过合成DNA标记探针并把其连接到转座子上，转化感受态细胞，并筛选突变株。第二，体内筛选，即通过模式动物或者是细胞系选择细菌突变株并通过PCR比较分析筛选那些在宿主中不存在的细菌株。在STM技术中，最关键的步骤为转座子的转化效率，提高转化效率是STM成功的关键。另外值得注意的是，在应用STM技术时，如果突变的基因对病原菌本身有致死性，那么这些基因就无法通过STM技术得到检测，而这些基因可能本身就是病原菌的毒力基因。因此，运用STM技术只能检测到那些相 ......