H IV‐1反转录混合液(RT Mix)和二巯基乙醇(DTT)解冻,离心3~5秒,将RNA酶(RNase)抑制剂和MuLV反转录酶取出,贮存在- 20℃冰箱中备用。按下表配制反转录反应体系:将RT反应体系振荡2~3秒混匀, 2000 × g离心1~2秒(注:RT反应体系的温度应保持在15~25℃之间,不能超过30℃)。将PCR管加盖后转移到PCR仪上,并提前设置好反应程序:按暂停键后,向每管加10 μ lRT反应体系,振荡2~3秒混匀,2000g离心1~2秒。 ......