十、避免载体自接的方法

重组质粒的构筑是要将DNA片段与载体连接起来，但实际上以一种限制性内切酶切开的载体，其两端常会自然的相接回去，载体自接的概率远超过与DNA片段的相接。例如外来DNA与载体都以BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ两种限制性内切酶作用，得到一端具有BamH Ⅰ序列，另一端为EcoR Ⅰ序列的DNA片段与载体，由于BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ的序列并不相同，无法配对，所以载体无法自接，不需要以碱性磷酸酶处理。 ......