FISH标本和探针,只要是双链结构,杂交前均需要将双链变成单链结构。探针常用的变性条件一般在75℃5min,如果探针为重复序列,变性后应立即置于冰上5~10min,尽快杂交。如果是单拷贝探针或涂染探针,则在变性后置于37℃水浴中30~60min,然后进行杂交。在预复性过程中,探针中的重复序列与加入的竞争物中的大量重复序列优先复性,而特异性单拷贝探针序列则因竞争物中同源序列拷贝数少,绝大部分仍处于单链状态,最后在合适的条件下杂交到特定的靶位点。 ......