三、细胞的冻存与复苏

因为细胞在不加任何保护剂的情况下直接冻存，细胞内外的水分会很快形成冰晶，并且随冰晶数量增多，会导致细胞脱水及渗透压增高等后果，从而造成细胞的损伤。目前细胞冻存多采用甘油或二甲亚砜作为保护剂，这两种物质在低温冷冻后对细胞均无明显毒性，并且分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性。加上缓慢冻存可使细胞内的水分渗出细胞外，在胞外形成冰晶，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成所造成的细胞损伤。细胞冻存液的配制：在含10% ～ 20%胎牛血清的RRMI 1640培养基中加入二甲亚砜 ......