[治疗]二、凝胶过滤色谱分离抗氧化肽研究方法

根据实验结果确定木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的最佳酶解条件。量取5g大豆分离蛋白溶于100ml蒸馏水中，调溶液pH至7.0，放入56℃水浴中，然后加入4%的木瓜蛋白酶，不断搅拌水解4小时。水解结束后，立即用100℃灭活10分钟，冷却至室温后，用4000r/min离心机离心10分钟，取上清液，制得大豆肽溶液。因此我们选取流速为0.3、0.5、0.7ml/min三个梯度对样品进行洗脱，根据洗脱图谱确定最佳的流速。在用凝胶层析分离蛋白质和多肽时常用的缓冲液为磷酸和水，所以我们分别用不同浓度的磷酸缓冲液和水对样品进行洗 ......