本章介绍了PCR技术的工作原理、基本反应步骤、反应体系的主要构成、反应条件的优化以及PCR技术的应用等知识。PCR技术是一种在体外扩增核酸的技术。其基本原理是在模板、引物、4种dNTP和耐热DNA聚合酶存在的条件下,特异扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的酶促合成反应。每一循环包括变性、退火和延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板,如此往返,介于两个引物之间的新生DNA片段理论上达到2n拷贝。以mRNA为模板,在反转录酶的作用下在体外反转录合成双链DNA(cDNA),再以此cDNA为模板进行P ......