（四）胚胎干细胞的培养

DMEM培养基，含4500mg/L葡萄糖、2mmol/L谷氨酰胺、0.1mmol/L β-巯基乙醇、1mmol/L丙酮酸钠、0.1mmol/L非必需氨基酸、20%胎牛血清、1000U/ml LIF。分别放在24孔培养皿中,培养皿已覆盖了STO或MEF滋养层细胞，每孔加1ml ES细胞培养基。4～5天后,内细胞团长成一簇簇的内细胞团，用Hanks液（无Mg2 +、Ca2 +）洗细胞团2次，用0.05%胰蛋白酶/ 0.02%EDTA消化细胞团5分钟，直至细胞团开始松散，离开培养皿的底部。以1∶5～1∶7稀释细 ......