二、小鼠胚胎干细胞的分离与培养

小鼠胚胎干细胞的培养应满足促进细胞增殖和抑制细胞分化的条件，来保持其高度未分化潜能。使用胚胎成纤维细胞作为饲养层培养ES细胞。培养的ES细胞呈集落状生长，细胞排列紧密，呈未分化状态。孕鼠（12.5～15.5日龄），饲养层细胞STO细胞（SLN或STO／N／L细胞株）。D‐Hanks液洗细胞团2次，用0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA消化细胞团5分钟，直至细胞团松散，离散成小细胞团块，脱离培养皿的底部。以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层，培养24～48小时后，胚胎从透明带中孵化出来，随着饲养层的移动而黏附到 ......