1966年Nakane和Pierce以酶标记抗体用于组织化学染色,1967年Catt Tregear报道了固相RIA,以酶替代放射性核素标记固相RIA,这样就形成了固相EIA,用来测定IgG。1971年Engvall和Perl mann为固相EIA起了名称,为酶联免疫吸附试验(en‐zy me‐linked immunosorbent assay,ELISA)。例如使用酶的分子量比IgG的分子量大,‐D半乳糖苷酶(540, 000)就能使抗体活性发生空间障碍,而底物检测和酶检测的限制可以改用荧光原、发光物 ......