[文献资料]8.4　分析方法

现在， LD活性定量采用连续监测分光光度法，测量NAD +与NADH的相互转化，检测A340nm变化速度。测定乳酸→丙酮酸比测定丙酮酸→乳酸更常用。乳酸→丙酮酸反应对NAD +和底物浓度的依赖性低。丙酮酸→乳酸反应使用相同底物浓度，但有较快的反应动力学，因此线性的丢失更早些[ 72 ， 73 ] 。乳酸和丙酮酸过量时都抑制酶活性，对H亚基的抑制作用比对M亚基抑制作用大。随反应pH增加，底物抑制作用下降。这一反应特性被用于LD1同工酶活性测定，因为α -羟丁酸脱氢酶的活性大部分是由于LD1反应催化而所得。L ......