三、亲和层析

亲和层析（affinity chromatography）是蛋白质分离纯化最有效的方法之一，在个别情况下，仅此一步纯化即可得到高纯度的目的蛋白。亲和层析是基于生物分子与层析柱上的配体发生特异性可逆结合的原理（图9-。例如，用于谷胱甘肽巯基转移酶（GST）亲和层析纯化的还原型谷胱甘肽偶联的琼脂糖凝胶颗粒1ml可以结合10mg GST蛋白，若要纯化5mg目的蛋白，则用1ml还原型谷胱甘肽偶联的琼脂糖凝胶颗粒装柱。在亲和层析中，尤其是利用抗原做配体时，往往需要利用酸性缓冲液（最常用的是pH 2.5的甘氨酸-盐酸 ......