二、3SR 反应的特点

1 ﹒ 3SR反应的引物设计与PCR引物基本相同，不同的是引物5 ′端需附加一段T7 RNA聚合酶结合位点和优先转录起始点，仅一个引物有T7启动子序列也可以启动3SR反应。其中大部分以异源杂交为基础，通过固相支持物捕获3SR产物，然后用标记的寡核苷酸探针以夹心法检测。尽管异源杂交法灵敏度较好，但该法需除去未杂交的探针，且固相支持物的位阻效应在一定程度上降低了杂交效率。它能区分杂交和未杂交的探针。TSPF的缺点是3SR产物与探针的杂交效率相对较低，从而要求前者的浓度要显著地高于后者，杂交分子形成的速率依赖于 ......