反向PCR可以扩增已知序列区间以外的序列。用限制性内切酶将基因组DNA完全消化,但目的序列上不应当有这个酶的切割位点,目的序列的片段通常短于2~3kb。扩增反应的主要产物是线状双链DNA,原先的已知序列分别为DNA的头—尾部的序列。其上游和下游顶端的连接点是原先于消化基因组DNA的限制性内切酶的酶切位点。 ......