[文献资料]第三节 方 法

1 .转染前24小时接种细胞（用混匀的、对数生长期传代的PHEC ） ，保证转染时细胞达70%的融合率（例：对于HUVEC ， 6孔板中每孔接种1.2 × 105个细胞） ，细胞于37 ℃ ， 5% CO2的培养箱中培养过夜。因为腺病毒对分裂与非分裂的细胞都能感染，因而需要根据转染基因的不同选用不同的病毒，即如果仅需要转导活化的分裂细胞，则应优先选用逆转录病毒作为载体，而如果需要对所有的细胞都有较高的导入率。通常情况下，虽然用腺病毒载体转导的效率高于逆转录病毒载体，但如果基因表达的起始浓度相对较高，由于载 ......