两条探针分别设计为与突变型和野生型模板互补,其两端分别使用报告基团和淬灭基团的染料进行标记,不同基因型的探针其报告基团荧光染料不一样,以便于检测。由于探针较短,没有与模板进行配对的探针报告基团和淬灭基团在空间构象上位置临近,由于荧光能量传递的关系,保持荧光灭活状态。在进行SNP检测时, PCR扩增的退火过程,可以导致探针与模板的杂交结合,当引物延伸至探针处时,由于DNA聚合酶的5 ′端外切酶活性,可以将探针的5 ′端报告基团从探针上切除,使之与淬灭基团分离,从而释放出相对应的荧光,而没有配对的探针仍然保持 ......