虽然免疫组织化学双重或多重染色与单染色原理相同,方法相似,但双重或多重染色操作步骤繁多,不同抗原的丰度、抗原性不一,相互之间可能出现交叉反应,并可能互相干扰,其敏感性和特异性易受多种因素影响。为了保证双重或多重染色的可靠性和成功率,染色的每一个环节都不容忽略。双重或多重免疫组织化学染色的主要注意事项如下。一般至少设置吸收实验、各种抗原的分别单染色、不加相应第一抗体的双重或多重染色,以及在间接法中将第一抗体孵育顺序互相交换的双重或多重染色等对照实验。 ......