在“非循环相”中,引物Ⅰ退火(复性)到模板RNA靶序列上,在AMT逆转录酶作用下,利用三磷酸脱氧核苷酸,使引物Ⅰ的3 ′端得以延伸,从而形成RNA模板的cDNA链,产生一种RNA‐DNA杂交体。在“循环相”中,每条新的RNA分子链又可作为模板参入“循环相”的反应,引物Ⅱ退火结合于模板上,在逆转录酶作用下使其延伸,同前产生RNA‐DNA杂交体,RNA酶H水解杂交体中的RNA链,引物Ⅰ又与留下的单链DNA复性结合,逆转录酶使其合成新的DNA。NASBA的扩增效率远高于PCR,每循环一次可有100倍以上的扩增, ......