四、标记探针的纯化

DNA探针标记结束后，反应体系中依然存在未掺入到探针中去的dNTP（标记的与未标记的）等小分子，如果不将它们去除，有时会干扰后续的杂交反应。通过凝胶过滤层析法或选择性沉淀法沉淀标记的DNA分子均可以很方便地去除这些小分子。当标记核苷酸的掺入效率超过60%时，探针在大多数情况下可以直接用于核酸杂交。凝胶过滤层析通过其分子筛作用，可以将大分子DNA和小分子dNTP、磷酸根离子以及寡核苷酸有效地分离开来，大的标记探针将首先从凝胶层析柱中流出，而小分子则滞留在其中。 ......