PCR扩增靶DNA序列的原理与体内DNA复制有一定的相似之处。不同的是,引物的本质是DNA而非RNA,复制DNA的酶是耐热的DNA聚合酶,如Taq酶,通过变性、复性和延伸3个步骤的交替循环,DNA得以大量扩增。PCR反应中具体的参数应根据所用引物的长度和序列等而决定,对于不同的引物可能需要预实验以确定最佳反应条件。PCR通常采用3步循环,94℃左右变性,一定温度复性(又称退火,主要根据引物长度及碱基组成而定),72℃延伸。扩增短片段时,也可使用2步法PCR,即变性、退火与延伸两步。我们相信,基于PCR的技 ......